音华生物—优选PCR试剂

【原理用途】

本产品是一种去除人抗凝全血中红细胞简便易行的方法，它几乎不损伤有核细胞又能充分地去除红细胞。本产品也可以用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化等实验中红细胞的去除，处理后的细胞可进一步用于原代培养、流式分析等细胞实验研究，或核酸、蛋白分离提取等下游分子生物学研究。

【运输储存】常温运输，15～25℃保存。启用开封后，建议 2个月内用完，避免因空气污染导致细菌繁殖，更低温度保存能延长使用期限。

【操作步骤】

从全血中得到白细胞：

1.   将 1.5ml 抗凝血与 4.5ml 红细胞裂解液（1: 3体积比）充分混合，室温裂解 10 分钟；

2.   离心（500g，4℃）3分钟，弃尽上清；

3.   加入 1ml 红细胞裂解液使沉淀重悬并充分混匀，转移至冻存管中，室温裂解5 分钟；

4.   离心（500g，4℃）3 分钟，弃上清，沉淀即为白细胞，-80℃或液氮保存。

组织细胞样品中去除红细胞：

1.   新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成单细胞悬液，离心（500g，4℃）3 分钟，弃尽上清；

2.   加入 1～2ml（大于 3 倍细胞体积）的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解 1-2 分钟；

3.   离心（500g，4℃）3分钟，弃尽上清；

4.   加入适量 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬细胞沉淀，洗涤 1～2 次，细胞可用于后续实验。